前言

乳腺癌(breast carcinoma)居我國女性惡性腫瘤發(fā)病率首位，是嚴重威脅女性健康的惡性腫瘤。隨著(zhù)乳腺癌相關(guān)研究的不斷進(jìn)展，作為臨床前體內研究的基礎，乳腺癌動(dòng)物模型的建立也在不斷進(jìn)步。乳腺癌實(shí)驗動(dòng)物模型可分為自發(fā)性、誘發(fā)性、移植性、轉基因或基因敲除型及乳腺癌遠處轉移型等5大類(lèi)，這些動(dòng)物模型為臨床試驗設計提供大量的客觀(guān)可靠的數據。

移植腫瘤動(dòng)物模型是指將乳腺癌組織或細胞移植于實(shí)驗動(dòng)物培養出的模型，目前應用較為廣泛。根據移植物來(lái)源分為同種移植和異種移植（多為人源性乳腺癌）。同種移植利用已建立的自發(fā)性或誘發(fā)性乳腺癌細胞株，在同種或同品系動(dòng)物中進(jìn)行移植，多為鼠源性乳腺癌，目前世界范圍內建立了很多的可移植性動(dòng)物乳腺癌細胞株，移植所用的乳腺癌細胞株有嚴格的種系特異性。常用的有：來(lái)源于BALB/c小鼠的4T1和TM40乳腺癌細胞株，C57BL/6小鼠的E0771乳腺癌細胞株，TA2系小鼠自發(fā)B型乳腺癌細胞株MA-737,615系小鼠自發(fā)B型乳腺癌中建立的細胞株（如MC-615、B6和B9、Ca615)等。同種移植法建立乳腺癌動(dòng)物模型的方法相對簡(jiǎn)單，將體外培養的細胞或者腫瘤組織塊， 接種同系小鼠背部或者乳腺脂肪墊下即可。

異種移植模型是利用已建立的人類(lèi)乳腺癌細胞株或人類(lèi)乳腺癌組織塊移植于免疫缺陷動(dòng)物體內所建立的動(dòng)物模型。難度相對較大，尤其是將人類(lèi)乳腺癌組織塊直接接種免疫缺陷小鼠建立動(dòng)物模型成功率不高。用人乳腺癌細胞株建立異種移植乳腺癌動(dòng)物模型，常用的人乳腺癌細胞株有：MCF-7、MDA-MB-231和MDA-MB-468等。

部分造模方法

使用動(dòng)物：裸鼠、小鼠

【造模機制】：

異種移植模型是指利用已建立的人類(lèi)乳腺癌細胞株移植于免疫缺陷動(dòng)物體內所建立的動(dòng)物模型。裸鼠和嚴重聯(lián)合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠，都是單基因隱性突變形成的，裸鼠T細胞免疫功能缺陷；SCID小鼠T、B細胞免疫功能?chē)乐厝毕?，因此人?lèi)的腫瘤和免疫活性細胞容易生長(cháng)不被排斥，裸鼠和SCID小鼠皮下是移植人類(lèi)腫瘤的理想位置，是體內篩選抗腫瘤藥物主要選擇的部位。

【造模方法】：

目前較常用的細胞株是雌激素受體陽(yáng)性的MCF-7人乳腺癌細胞株。復蘇MCF-7細胞后，用DMEM完全培養基擴大培養后制備}1×107/ml的單細胞懸液，每只0.2ml，注射于6~8周齡的裸鼠背部，出針后用醫用棉簽按壓1~2分鐘，防止細胞懸液從針孔處漏出。待腫瘤體積增長(cháng)至1cm×1cm×1cm體積時(shí)取腫瘤組織，置于不含牛血清的培養基中，剝離干凈，剪成大小約1mm×1mm×1mm的小塊，用20ml注射器的針頭和1ml的注射器于裸鼠背部，每只注射1個(gè)瘤塊，出針后用醫用棉簽按壓，直至無(wú)液體從針孔漏出。觀(guān)察裸鼠的飲食活動(dòng)及精神狀態(tài)等一般情況，待瘤體積增長(cháng)至0.5cm×0.5cm×0.5cm即可隨機分組進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗。該移植瘤模型也可選用SCID小鼠進(jìn)行，成功率更高，方法同上。

【模型特點(diǎn)】：

動(dòng)物接種瘤塊2周后進(jìn)入瘤組織快速增長(cháng)期，隨著(zhù)時(shí)間的延長(cháng)，腫瘤組織外圍布滿(mǎn)豐富的血管，瘤體逐漸增大。無(wú)外因干擾，該移植瘤模型維持2個(gè)月左右，隨著(zhù)瘤體積的增大，機體出現惡病質(zhì)狀，直至死亡。

【模型的評估和應用】：

該模型腫瘤生長(cháng)能模擬人惡性腫瘤成瘤后過(guò)程，成瘤率高，時(shí)間均一，瘤體大小和重量容易測量，便于進(jìn)行基礎和臨床前研究。由于宿主原因（特別是NK細胞的活性）裸鼠皮下移植的人類(lèi)腫瘤很少發(fā)生轉移和侵襲鄰近組織，保持人類(lèi)腫瘤的組織形態(tài)和免疫學(xué)特點(diǎn)以及特有的染色體組型和對抗腫瘤藥的原有敏感，且培養條件等要求比SCID小鼠低，易于動(dòng)態(tài)觀(guān)察腫瘤的生長(cháng)狀態(tài)，因此，裸鼠是目前進(jìn)行人乳腺癌細胞異位移植最為常用的實(shí)驗動(dòng)物。

【模型評估和應用】：

移植乳腺癌動(dòng)物模型優(yōu)點(diǎn)多：首先這些乳腺癌細胞株的生物學(xué)特性比較明確，其次建立模型周期短，均一性好，腫瘤成長(cháng)速度較一致，個(gè)體差異小，并且可以在實(shí)驗動(dòng)物中連續移植，長(cháng)期保留，易于觀(guān)察對照，便于科研成果相互比較和交流，是目前抗癌藥物篩選和藥效學(xué)研究常用的方法。尤其很多實(shí)驗室經(jīng)過(guò)篩選鑒定后獲得乳腺癌骨轉移、腦轉移細胞株更具有特色。但是，用人類(lèi)腫瘤細胞在免疫缺陷小鼠上建立模型需要選用周齡小一點(diǎn)的裸鼠（裸鼠只是細胞免疫功能缺陷，但隨著(zhù)生長(cháng)發(fā)育，其細胞免疫功能會(huì )恢復一點(diǎn)，所以周齡大的裸鼠腫瘤接種成功機會(huì )減少），尤其是用組織塊接種免疫缺陷小鼠，多數用martix gel包被，有時(shí)對雌激素受體陽(yáng)性腫瘤需輔助增加雌激素以保障模型建立成功，且SCID小鼠的遺傳背景是否純正也很關(guān)鍵。

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