前言

腎小球疾病(glomerular diseases)是病因、發(fā)病機制、臨床表現、病理改變、病程和預后不盡相同的主要累及雙腎腎小球的一組疾病，可分為原發(fā)性、繼發(fā)性和遺傳性。多數腎小球腎炎是免疫介導性炎癥疾病。一般認為，免疫機制是腎小球病的始發(fā)機制，腎小球疾病動(dòng)物模型在探討發(fā)病機制、病理過(guò)程以及臨床治療等方面發(fā)揮重要作用。本節主要介紹了系膜增殖性腎小球腎炎、Thy1系膜增生性腎炎、微小病變型腎病、IgA腎病以及腎小球硬化性腎病動(dòng)物模型的建立方法和特點(diǎn)。

Thy1系膜增生性腎炎(mesangial proliferalive glomerulonephritis,MsPGN)模型為大鼠胸腺細胞抗體誘發(fā)的系膜增生性腎炎模型，是目前廣泛應用并公認比較典型的腎炎模型。

部分造模方法

使用動(dòng)物：大鼠

【造模機制】：

Thy1為大鼠胸腺細胞分化抗原，Thy1抗血清可直接與大鼠系膜細胞表面抗原結合激活補體形成膜攻擊復合體，導致細胞裂解，從而引起殘存的系膜細胞增生。經(jīng)其反復攻擊后，系膜細胞增生能較長(cháng)時(shí)間持續，最終成功誘發(fā)Thy1系膜增生性腎炎模型。

【造模方法】：

1.實(shí)驗過(guò)程 家兔抗大鼠胸腺細胞抗血清的制備：卡介苗預致敏新西蘭大家兔，14天后見(jiàn)兩側腘窩淋巴結腫大，注射胸腺細胞(1011/L）與弗氏完全佐劑。3周后同樣途徑再次免疫。2周后經(jīng)耳緣靜脈第3次免疫。1周測效價(jià)，滿(mǎn)意后頸動(dòng)脈放血，收集血清，家兔抗血清經(jīng)大鼠肝粉吸附，-20℃保存，使用前56℃水浴30分鐘滅活補體。

模型制備：取大鼠(6~8周）尾靜脈注射家兔抗血清(0.6ml/100g)，分別于后1天、3天、5天、7天、2 周、3周、4周和5周處死動(dòng)物，取腎臟做相應檢查。

2.指標檢測 處死前隔日觀(guān)察其尿量、飲水量、24小時(shí)尿蛋白定量，將腎臟病理切片進(jìn)行H&E染色，光鏡觀(guān)察腎小球的病理變化，同時(shí)對細胞核增殖抗原(PCNA)、α－平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)進(jìn)行免疫染色觀(guān)察，并計數腎小球系膜有核細胞。

【模型特點(diǎn)】：

1.連續4次注射家兔抗血清，4周即可成功地建立Thy1系膜增生性腎炎模型。

2.病變明顯，系膜基質(zhì)增多顯著(zhù)，病變腎小球體積增大，第1天系膜溶解，腎小球數明顯減少，第3天細胞開(kāi)始增生，第7天顯著(zhù)增加并可維持到第5周。

3.誘導28天、35天時(shí)，PCNA、α-SMA陽(yáng)性細胞增多且病變持續時(shí)間較長(cháng)。

【模型評估和應用】：

腎小球系膜細胞增生以及系膜基質(zhì)增多是多種類(lèi)型腎炎常見(jiàn)的病理變化，也是腎小球硬化的早期階段特征。該模型腎炎病變明顯，系膜細胞增生顯著(zhù)且持續存在，系膜細胞α-SMA持續陽(yáng)性，表明系膜細胞一直處于活化增殖階段，病變持續活動(dòng)，更符合臨床上所見(jiàn)到的人類(lèi)系膜增生性腎炎。該模型利用弗氏完全佐劑增強免疫，縮短了造模時(shí)間，癥狀典型，是目前國內外公認的研究系膜增殖性腎炎發(fā)病機制和防治措施的理想模型。

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