1、病理樣本保存方法
固定法：
（1）浸入法
從人體或動(dòng)物取下的小塊組織，立即置入液態(tài)固定劑中進(jìn)行固定，這是最常用的方法。通常標本與固定液的比例為1:10~1:20，但組織塊不宜過(guò)大過(guò)厚，否則固定液不能迅速滲透，條件允許可2h以?xún)刃韪鼡Q一次固定液。
（2）灌注法
組織塊體積大或固定液極難滲入內部，可將固定液經(jīng)心臟灌入，經(jīng)血管分支到達整個(gè)組織和全身，從而充分固定。該法普遍應用于腦部疾病的科學(xué)研究。利用天然血管網(wǎng)，快速、均勻地保存標本，以保持標本類(lèi)似活體狀態(tài)、盡量保持抗原性。
凍存法：
冰凍樣本能夠較好的保存組織的抗原免疫活性，其制作過(guò)程較石蠟切片快捷、簡(jiǎn)便，缺點(diǎn)是細胞內易形成冰晶而破壞細胞結構，組織形態(tài)不完整，不利于診斷；
① 動(dòng)物組織需盡快取材保存，取材應在冰上進(jìn)行，取材后組織用生理鹽水沖洗干凈，去除血漬和污物，并剔除非研究所需的組織;
② 吸干水漬并切小塊，放入已標記的保存容器中，液氮速凍后，轉運至-80℃冰箱保存，運輸時(shí)請使用大體積干冰運輸。
常規組織解剖取材固定注意事項：
① 取材手法：要求解剖器械鋒利，盡可能選擇薄且鋒利的手術(shù)刀片，減少剪刀的使用，避免擠壓挫傷標本表面。較準確地取到目的部位組織，夾取標本的時(shí)候盡量遠離目的區域組織。
② 取材速度：盡量保證樣本離體后1min內放入到合適的固定液內。如果一只動(dòng)物同時(shí)取多種器官，優(yōu)先取消化器官，其次取中樞神經(jīng)系統器官(腦，脊髓等)，皮膚、肌肉等可放到最后取。
③ 組織塊大?。?/span>未經(jīng)灌注的標本組織厚度不要超過(guò)1cm，因為固定液的滲透作用有限。
④ 固定液：針對不同的標本特點(diǎn)及實(shí)驗目的一定要選用正確的固定液。
⑤ 固定液量：固定液體積為組織的10-20倍，組織能在容器內自由移動(dòng)，不貼壁不沉底，做好清晰標記。
⑥ 固定溫度：常溫即可，無(wú)需冷藏，切勿冷凍結冰，否則固定液結冰形成冰晶嚴重破壞組織形態(tài)結構。
⑦ 在PBS或者生理鹽水中緩慢沖洗，去除血液，用濾紙吸干水分，保持固定液不渾濁。
⑧ 單獨的小組織（如類(lèi)器官軟骨球）需直徑達到1.5mm才能進(jìn)行檢測，包裹在水凝膠里面的類(lèi)器官需做標記（可用標記品紅），以便后期切片能夠定位組織位置。
常用實(shí)驗動(dòng)物（大小鼠、實(shí)驗兔等）的各臟器取材方法（參考）
注：當組織塊不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm時(shí)，推薦整體取材固定；如大動(dòng)物相關(guān)臟器或組織過(guò)大，可參考以下方法
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系統名稱(chēng) |
組織部位 |
取材方法（參考) |
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消化系統 |
胃 |
無(wú)特別指定時(shí)，選取縱向垂直于胃壁取一長(cháng)條切片（同時(shí)切到胃粘膜和肌層），注意清理干凈胃組織內容物 |
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腸 |
可選橫切圓環(huán)狀、或縱切長(cháng)條狀，肌層容易脫落,取材時(shí)應動(dòng)作輕緩，用PBS或生理鹽水緩慢沖洗腸道內部，祛除腸道內容物，保持固定液不渾濁，不宜太短（2cm左右），太短容易造成后期切片腸道肌層不完整 |
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肝 |
每頁(yè)肝臟剖開(kāi)固定（使用手術(shù)刀）,可取葉肝切最大面，葉肝橫切看月牙狀，及其他肉眼可見(jiàn)的病變或者突起。若肉眼不可見(jiàn)，建議間隔多做切片，以便后期診斷 |
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胰腺 |
整體取材，大小不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm |
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呼吸系統 |
肺臟 |
大鼠可取一葉橫切肺，小鼠可取單獨一葉肺（左肺）或五葉整肺（盡可能全肺包埋 )，若有病變可取病健交界的位置 |
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氣管 |
氣管任意一段1.0-2.0cm，大動(dòng)物不超過(guò)2.0cm×2.0cm×全層 |
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泌尿系統 |
腎臟 |
剖開(kāi)固定（使用手術(shù)刀）,縱切選冠狀蠶豆狀最大面，橫切取扇形最大面 |
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膀胱 |
小動(dòng)物整體取材，或取包括全層結構的膀胱組織一塊，大小不超過(guò)2.0cm×2.0cm |
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內分泌系統 |
甲狀腺 |
整體取材，大小不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm |
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腎上腺 |
整體取材，大小不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm |
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循環(huán)系統 |
心臟 |
灌注固定（如果只做病理），或者剖開(kāi)固定（使用手術(shù)刀） |
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主動(dòng)脈 |
主動(dòng)脈一段1~1.5cm |
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神經(jīng)系統 |
大腦 |
建議灌注后整體取材，這樣固定效果更好，未做灌注取材的樣本在后期組織很容易散開(kāi) |
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小腦 |
建議灌注后整體取材，這樣固定效果更好，未做灌注取材的樣本在后期組織很容易散開(kāi) |
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脊髓 |
頸、胸和腰髓三段0.5－1.0cm，需使用特定固定液進(jìn)行固定 |
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垂體 |
整體取材 |
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免疫系統 |
脾臟 |
取1－2塊組織，包括包膜，如果眼觀(guān)有病變，取病健交界的位置 |
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淋巴結 |
一般整體取腸系膜淋巴結和給藥局部淋巴結，最大不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm |
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胸腺 |
可整體取材，取胸腺組織一塊并帶包膜，或包埋其中一頁(yè)橫切（最大面） |
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生殖系統 |
卵巢 |
整體取材，盡量剔除周?chē)窘M織，以免固定漂浮 |
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子宮 |
整體取材或選擇橫切（環(huán)切），最大不超過(guò)2.0cm×2.0cm×全層 |
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睪丸 |
兩側睪丸整體取材或選擇橫（縱）切，需使用特定固定液進(jìn)行固定 |
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附睪 |
橫切附睪頭或其他規定方向 |
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前列腺 |
整體取材，最大不超過(guò)2.0cm×2.0cm×0.5cm |
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其他組織 |
皮膚 |
縱切（觀(guān)察皮膚全層）或橫切（毛囊橫切），要提前備皮，皮膚固定不要卷曲，需要平整鋪開(kāi) |
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腫瘤 |
整體取材，若組織過(guò)大過(guò)厚需要切開(kāi)固定（手術(shù)刀），切最大橫截面 |
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肌肉 |
優(yōu)先選取肌束生長(cháng)方向明顯的位置選擇橫切或豎切，需特定固定液固定 |
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眼球 |
整體取材，勿用鑷子用力夾取眼球組織， 需使用特定固定液進(jìn)行固定 |
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骨組織 |
需充分脫鈣，組織變軟后方可取材,若只觀(guān)察骨或關(guān)節，剔除周?chē)∪饨M織 |
常規病理形態(tài)樣本保存及運輸方法（以下組織大部分用于做石蠟切片或冰凍切片）
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組織類(lèi)型 |
保存條件 |
保存運輸條件 |
組織類(lèi)型 |
保存條件 |
保存運輸條件 |
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常規動(dòng)物組織 |
10%中性甲醛或4%多聚甲醛固定液固定 |
常溫 |
細胞爬片 |
爬片后4%多聚固定0.5h，吸取固定液后立即送檢 |
常溫 |
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眼球 |
眼球固定液固定 |
常溫 |
新鮮組織做冰凍切片 |
液氮速凍后﹣80℃長(cháng)期保存 |
干冰或液氮 |
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肌肉 |
肌肉固定液固定 |
常溫 |
固定組織做冰凍切片 |
對應的固定液，常溫 |
常溫 |
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睪丸 |
睪丸固定液固定 |
常溫 |
脫鈣完成的骨組織或鈣化組織 |
75%保存即送 |
常溫 |
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脊髓 |
脊髓固定液固定 |
常溫 |
冰凍切片 |
-20℃保存 |
干冰+少量冰袋 |
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